新工藝｜連續(xù)流技術(shù)遇到酶催化技術(shù)會發(fā)生什么有趣的反應(yīng)呢？

· 柯提斯重排反應(yīng)

在化學品實際生產(chǎn)中，柯提斯重排反應(yīng)（英文Curtius rearrangement）是常見制備伯胺的方法，但因為反應(yīng)涉及到疊氮化合物的參與并產(chǎn)生氮氣是一類典型“危險反應(yīng)”。加強反應(yīng)的過程控制對此類反應(yīng)的安全進行至關(guān)重要。

連續(xù)流微反應(yīng)器可以顯著提高有效傳質(zhì)和傳熱，還可以限制有害中間體的數(shù)量，減輕安全隱患。

近期輝瑞公司在對新型ACC抑制劑的研究中成功應(yīng)用連續(xù)Curtius重排反應(yīng)合成啶內(nèi)酰胺部分（6，Scheme 1）。

勃林格殷格翰公司的研究人員在生產(chǎn)目標化合物7（Scheme 1）的Curtius重排反應(yīng)過程中，通過連續(xù)流降低了批次中芐醇含量并且連用在線IR監(jiān)測，實現(xiàn)了0.75 kg / h的產(chǎn)量（約80％的收率）。

· 關(guān)于固定化酶催化

固定化酶催化技術(shù)的發(fā)展，使生物催化在合成工藝中得到拓展。該項技術(shù)具有以下優(yōu)缺點。

連續(xù)流技術(shù)可通過增強的傳質(zhì)來提高生物轉(zhuǎn)化的速度，以小結(jié)構(gòu)促進大生產(chǎn)；可以嚴格控制反應(yīng)參數(shù)以提高產(chǎn)量和生產(chǎn)率。

隨著連續(xù)流技術(shù)在合成過程中的成功應(yīng)用，研究者也把關(guān)注點拓展到下游的分離和純化工藝上來。

二、 實驗詳情

· 概述

近柏林大學化學院Marcus Baumann等人研究了在連續(xù)Curtius重排過程中，利用酶的化學選擇性將雜質(zhì)標記和修飾成新化合物，這些化合物可使用常見純化技術(shù)輕松清除。是比較新穎的合成組合和相應(yīng)的下游加工工藝創(chuàng)新。

· 連續(xù)流+生物酶催化的Curtius重排

1、 使用芐醇（BnOH）作為親核試劑的Curtius重排過程的中間體異氰酸酯與（Scheme 3）高沸點產(chǎn)品9a-d的共極性，除去殘留的芐醇在放大規(guī)模上是比較困難。

2、 使用生物催化可以促進在連續(xù)流下的簡單純化。以 4-（三氟甲基）苯甲酸（8a）轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的Cbz-氨基甲酸酯9a為例（Scheme 4）

3、 利用南極洲念珠菌脂肪酶B（CALB）作為催化劑，在丁酸乙烯酯（10）存在下，將苯甲醇轉(zhuǎn)化為丁酸芐酯（11）。酶床的長度約為8 cm的CALB色譜柱可以使芐醇的*轉(zhuǎn)化。酶的性能在數(shù)次運行中（5×1 mmol規(guī)模）并沒有降低，蒸發(fā)并萃取（EtOAc / H2O）后，分離出產(chǎn)物9a。

· 放大反應(yīng)

為了證明該流程的可擴展性，進行了放大實驗。

使用上述流動裝置（Scheme 5），并與裝有3.0 g固定CALB的更大的色譜柱以0.5 mL / min的流速泵送DPPA（0.9 M的甲苯溶液）和底物（1 M的甲苯溶液，1.0當量的NEt3、1.8當量的BnOH）。粗產(chǎn)品蒸發(fā)并從庚烷中結(jié)晶為白色結(jié)晶固體。分離的產(chǎn)率為83％，得到22g純的氨基酸酯9a，通過量為6.6g / h。

在整個放大過程中，樣品均通過HPLC和1H NMR光譜進行了分析，所有情況下都使用CALB對殘留的苯甲醇進行了定量轉(zhuǎn)化（圖2）。

圖2固定化酶柱子的外觀

三、實驗總結(jié)

該工藝過程中殘留的苯甲醇轉(zhuǎn)化為丁酸芐酯，在分離過程中可以輕松清除丁酸芐酯。研究證明了連續(xù)的Curtius重排反應(yīng)與有效的生物催化轉(zhuǎn)化相結(jié)合的優(yōu)勢。

在連續(xù)過程的放大過程中，固定在玻璃柱中的固定式CALB非常穩(wěn)健。以高收率和分析純度分離出所需產(chǎn)品，不到4小時約22 g的產(chǎn)品。

在連續(xù)流工藝的純化處理環(huán)節(jié)使用酶作為純化工具突出了連續(xù)流工藝下游處理工藝的創(chuàng)新，為連續(xù)流工藝應(yīng)用擴展提供了新的思路。

綜上該研究很好的將連續(xù)流技術(shù)和酶催化技術(shù)結(jié)合，相互促進，有效降低了合成工藝后處理的難度，提高了整個連續(xù)化生產(chǎn)效率。在化學合成工藝的探索中有更多像這樣多項技術(shù)結(jié)合產(chǎn)生促進作用的“有趣反應(yīng)”，等著大家去探究！

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本文參考：DOI 10.1021/acs.oprd. 0c00420

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